润扬仪器:薄层色谱扫描仪的工作原理及操作方法

润扬仪器:薄层色谱扫描仪的工作原理及操作方法

日期:2019-12-18

我们把用于定量的薄层色谱仪称为薄层色谱扫描仪(TLC Scanner),或薄层色谱光密度计(TLC Densitometer),用这种仪器对薄层上被分离的物质进行直接定量的方法称为薄层色谱扫描法。目前市场上生产的薄层色谱仪规格不同,性能各异,但其基本测定原理是一样的,即用一束长宽可以调节的一定波长、一定强度的光照射到薄层斑点上进行整个斑点的扫描,用仪器测量通过斑点或被斑点反射的光束强度的 变化从而达到定量的目的。       

薄层色谱扫描仪操作方法:  

(1)薄层板制备除另有规定外,将1份固定相和3份水在研钵中向一方向研磨混合,去除表面的气泡后,倒入涂布器中,在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布 (厚度为0.2~0.3mm),取下涂好薄层的玻板,置水平台上于室温下晾干,后在110℃烘30分钟,即置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度 (可通过透射光和反射光检视)。    

(2)点样除另有规定外,用点样器点样于薄层板上,一般为圆点,点样基线距底边2.0cm,样点直径及点间距离同纸色谱法,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。    

(3)展开展开缸如需预先用展开剂饱和,可在缸中加入足够量的展开剂,并在壁上贴二条与缸一样高、宽的滤纸条,一端浸入展开剂中,密封缸顶的盖,使系统 平衡或按正文规定操作。将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中,浸入展开剂的深度为距薄层板底边0.5~1.0cm(切勿将样点浸入展开剂中),密封缸 盖,待展开至规定距离(一般为10~15cm),取出薄层板,晾干,按各品种项下的规定检测。   

(4)如需用薄层扫描仪对色谱斑点作扫描检出,或直接在薄层上对色谱斑点作扫描定量,则可用薄层扫描法进行。

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