乙醇消毒剂含量的气相色谱仪测定

乙醇消毒剂含量的气相色谱仪测定

日期:2020-2-27

消毒剂,是用于杀灭传播媒介上的微生物使其达消毒或灭菌要求的制剂。目前,新型冠状病毒肺炎疫情形势依然严峻,在《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案》,新冠对紫外线和热敏感,56℃ 30分钟、乙醚、75%乙醇、含氯消毒剂、过氧乙酸和氯仿等脂溶剂都可以有效灭活病毒。

一时间,75%乙醇消毒剂成了大家抢购的目标,成为了随身携带的必备之物。然而,许多不明真相的吃瓜群众只看到了“乙醇”一词,甚至一度传出饮酒防新冠、白酒能消毒的谣言。乙醇的用途很广,可用乙醇制造醋酸、饮料、香精、染料、燃料等。医疗上也常用体积分数为70%~75%的乙醇作消毒剂等,在国防化工、医疗卫生、食品工业、工农业生产中都有广泛的用途。

必须指出,选择正确浓度的酒精是非常关键的,蕞适于消毒的是75%的医用酒精,无论浓度过高或者过低都无法有效杀灭病毒。75%酒精主要作用是破坏蛋白质,使其丧失生物功能。冠状病毒是一种有包膜的病毒,75%的酒精可以在病毒的表面蛋白质包膜未变性前渗透入内部,使病毒所有蛋白都脱水变性凝固,达到彻底杀死病毒的效果。但酒精浓度并非越高越好。因为在高浓度酒精下,病毒外膜会迅速形成固化层,像盾牌一样阻止酒精深入内部,无法达到杀毒效果。而过低浓度的酒精,则不能使病毒蛋白质变性,亦无法有效消毒。

《乙醇消毒剂卫生标准》GB/T 26373-2010规定了乙醇消毒剂的原料要求和技术要求、应用范围、使用方法、检验方法、标志和包装、运输和贮存、标签和说明书及注意事项。适用于以乙醇为主要原料制成的乙醇消毒剂 ,包括乙醇与表面活性剂、食用色素、护肤成分和食用香精等配伍的消毒剂。不适用于乙醇与其他杀菌成分复配的消毒剂,也不适用以乙醇为溶剂的消毒剂。

对于乙醇消毒剂有效成分含量测定,润扬仪器采用顶空气相色谱仪建立消毒液中乙醇含量测定方法,提高测定方法的灵敏度和准确性。方法通过建立内标法和外标法,检测消毒液中乙醇含量,并经方法学验证。结果用外标法检测,回收率为 80.3% ~ 90.1% ,蕞低检测限为7. 90 mg / L,精密度为1.23% 。用内标法检测,回收率为 95. 1% ~ 106. 4% ,蕞低检测限为 1. 41 mg / L,精密度为1. 15% 。结论 内标法测定消毒液中乙醇含量比外标法更为灵敏、准确,重复性好。

1 材料与方法

1. 1 仪器及试剂材料

1.1.1 仪器:气相色谱仪( GC-2020型,润扬仪器) ,配氢火焰检测器( FID) ;顶空进样器(AHS-6890A);色谱柱( HP -INNOWAX,30m × 0. 25mm × 0. 25μm) ;电子分析天平( FA2004B) ;UPTA-10纯水机;氮氢空气源;色谱工作站。

1.1.2 试剂:无水乙醇( 分析纯) ,正丁醇( 分析纯) ,氯化钠( 分析纯) 均购自国药集团化学试剂有限公司,甲醇( Fisher Scientific,色谱纯) ,超纯水。

1. 2 实验方法

1. 2. 1 仪器条件

进样口温度 280℃ ,分流比70∶ 1;载气为氦气,流速 1. 0 ml / min。

升温程序:50℃ ,保持 5 min;20℃ ,保持 3. 5 min;120℃ ,保持 2min;总运行 10. 5 min。

FID检测器温度 240℃ ,空气流速 300 ml/min,氢气流速 30 ml/min。

1. 2. 2 外标法

① 标准系列配制:用甲醇配制成乙醇质量浓度分别为 0、100、300、500、1 000 及2 000 mg / L 的乙醇标准系列,进样 1 μl,测其峰面积,以乙醇峰面积对其含量绘制标准曲线。

② 样品处理:取样品 1 ml,用甲醇定容至 10 ml 容量瓶中,混匀,逐级稀释1 000倍。10 000 rpm 离心 10 min,通过自动进样器直接进样,进样量为 1 μl。每批样品取 3 个平行样,每样重复测定 2 次。

1. 2. 3 内标法

① 对照溶液配制: 准确称取 1. 0 ~1. 1 g 正丁醇( 内标) ,1. 5 ~ 1. 7 g 乙醇,用纯水定容至 10 ml 容量瓶中,稀释 100 倍,进样 1 μl。

② 样品处理:分别准确称取 0. 1 g 氯化钠、1. 0 ~ 1. 2 g 正丁醇及 2. 0 ~ 2. 2 g 样品( 根据样品中乙醇含量高低确定样品量,尽可能使得试样与对照溶液中乙醇浓度相近) ,用纯水定容至 10 ml 容量瓶中,混匀后,稀释100 倍。10 000 rpm 离心 10 min,进样 1 μl。

1. 2. 4 方法学验证

①回收率:外标法,平行取 3份已知乙醇含量的免洗消毒液样品约 0. 5 g,分别加入 0. 05、0. 25 和 0. 45 g 无水乙醇,用纯水定容至 10ml 容量瓶中,混匀后,纯水稀释 100 倍。按照 1. 2. 1的仪器条件进行检测。内标法,分别称取 0. 1 g 氯化钠、1. 0 g 已知乙醇含量的消毒液样品及 0. 8 g 无水乙醇,用纯水定容至 10 ml 容量瓶中,混匀后,纯水稀释 100 倍。

②重复性:取同一批次的消毒液,配制 6 份供试品溶液,进行乙醇含量测定,用相对标准偏差表示。

③线性与范围:外标法,取对照品储备液,稀释成不同浓度样品,采用拟定的色谱条件测定,以浓度( X) 对峰面积( Y) 进行线性回归,考察线性范围。内标法,采用单点校正。

④蕞低检测限:取无水乙醇的甲醇 ( 水) 溶 液,逐级稀释,信 噪 比( S /N) 3∶ 1时对应的乙醇浓度为蕞低检测限。

2 结果

2. 1 色谱条件

经测定显示,外标法甲醇和乙醇可达到基线分离;内标法分离度正丙醇与乙醇计算大于 9,理论塔板数不小于20 000。

2. 2 线性范围和检测限

测定时,将样品稀释到含乙醇 2 000 mg /L 以内,允许其在选择线性范围,内标法采用单点校正;外标法线性良好,线性方程 Y = 2. 926 × 104X +1. 630 × 105,r = 0. 9999。检测限结果,外标法为7. 90 mg / L,内标法为 1. 41 mg / L。定量限结果,外标法为 26. 35 mg /L,内标法为 4. 70 mg /L。

2. 3 回收率试验结果

回收率试验结果表明,外标法回收率为 80. 3%~ 90. 1% ,RSD 为 1. 35% ; 内标法回收率为 95. 1%~ 106. 4% ,RSD 为 1. 21% 。

2. 4 检测精密度

取同一份含乙醇消毒液样品,配制成待测样品,分别平行测定 6 次,以 6 个结果求得精密度结果表明,外标法为 1. 23% ,内标法为 1. 15% 。

3 讨论

试验结果显示,用内标法检测消毒液中乙醇含量,具有实验条件影响小、准确度和精密度较高等优点。通过方法验证看出,对于凝胶类基质消毒剂,内标法结果优于外标法,而 2002 年版《消毒技术规范》中乙醇含量的测定采用的是外标法。由于不同基质消毒剂在水中或有机溶剂中溶解度不同,因而导致实际测定含量偏低。对于此类样品采用外标法直接进样分析检测,会因为部分析出而导致测定浓度低于实际浓度。本实验所用内标法通过加入氯化钠增大样品组分活动系数,使凝胶充分溶解,因而提高了加样回收率。实践证明,含乙醇的凝胶类及其类似剂形,推荐用内标法测定乙醇含量。

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