棒状薄层色谱仪所用柱一般为氧化铝/硅胶色谱棒,色谱棒需要活化的主要原因包括以下几点,这些操作对保证棒状薄层色谱仪分析的准确性和稳定性至关重要:
一、去除残留杂质,净化色谱棒
新柱残留处理
新色谱棒在制造过程中可能残留未聚合的固定相单体、溶剂(如制备固定相时使用的有机溶剂)或其他污染物。活化过程是在一定的时间内通过氢火焰高温烧烤,使这些挥发性杂质挥发掉,避免其在分析时干扰样品分离或污染检测器(如鬼峰、拖尾、基线漂移等)。
使用中污染物的清除
色谱棒使用后,色谱棒可能吸附样品中的高沸点杂质(如油脂、聚合物、极性污染物等),或因样品分解产生残留。活化可通过高温将这些污染物分解或脱附,恢复柱子的分离性能。
二、稳定固定相,提高柱效
固定相的均匀化
固定相(如色谱棒外面的涂层)在高温下会进一步均匀分布,形成更稳定的液膜或吸附层,减少因固定相分布不均导致的峰展宽或拖尾,提高分离效率。
固定相的聚合与交联
色谱棒的固定相需要多次涂装并通过高温烧结促进交联反应,增强固定相对柱壁的附着力,避免使用中因溶剂或高温导致固定相流失,延长色谱棒寿命。
三、改善基线稳定性,减少噪声
未活化的色谱棒可能因残留杂质或固定相不稳定,在检测器(如TLC/ FID)中产生持续的信号波动(基线漂移、噪声)。活化后,杂质被去除,固定相流失减少,基线会更平稳,提高检测灵敏度和结果的可靠性。
四、适应分析条件,确保重复性
活化过程使色谱棒在目标分析速度下达到稳定状态,避免首次使用时因固定相或杂质的突然变化导致保留时间漂移或峰形异常,确保多次分析结果的重复性。
棒状波层色谱棒活化操作注意事项:
速度控制:活化可选择比扫描速度慢一个档次的速度,但避免使用过慢速度,避免高温停留时间过长而流失表面涂层;
气体流量:色谱棒活化时使用正常扫描流量或稍高;
时间设定:根据色谱棒污染程度,通常活化时间为40秒、50秒(如新棒一般首次为50秒);
活化次数:对于首次使用的新棒一般需要活化3-5次,按50秒/次一支棒活化。老棒每次分析后活化一次即可,按40秒/次进行。
总之,棒状薄层色谱棒活化是通过物理作用(去除杂质、稳定固定相)优化棒性能的必要步骤,直接影响展开分离效果、检测精度和分析方法的可靠性。