薄层色谱仪在中药有效成分检测应用

薄层色谱仪在中药有效成分检测应用

日期:2022-2-28

中药有效成分的定性鉴别有多种方法,其中薄层色谱法(TLC)较为常用。2021年12月20日的《中国药业》(第30卷第24期)里的《安肠胶囊质量标准提升研究》,就采用了采用薄层色谱法对安肠胶囊制剂中的黄芪、白头翁、补骨脂、白术等进行了定性鉴别。薄层色谱仪在中药有效成分检测应用

以黄芪为例,其测试方法如下:

1、取样品内容物5g,用瓶口分液器加甲醇30mL,超声(功率为600W,频率为40kHz,下同)处理20min,放冷,滤过,滤液挥干。

2、残渣加水20mL使溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取2次,各20mL,弃去水液,合并正丁醇液。薄层色谱仪在中药有效成分检测应用

3、用1%氢氧化钠溶液洗涤2次,各20mL,弃去碱水液,合并正丁醇液。

4、用正丁醇饱和水溶液洗涤2次,各20mL弃去水液,挥干处理后的正丁醇液,残渣加甲醇1mL使溶解,作为供试品溶液。

5、取黄芪甲苷对照品,加甲醇制成质量浓度为1mg/mL的对照品溶液。

6、按工艺称取缺黄芪的其余药材,制备缺黄芪的阴性样品,取5g,同供试品溶液制备方法制备缺黄芪的阴性对照品溶液。

7、用赫施曼定量毛细管精密吸取上述溶液各4μL,依次点于同一硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-三cl甲烷-甲醇-水(8:4:5:2,V/V/V/V)于10℃下放置1h后的下层溶液为展开剂,于30℃下展开8cm,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,105℃加热至斑点显色清晰,置紫外光(365nm)灯下检视。

8、供试品溶液色谱中,在与对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点,斑点比移值适中,且阴性对照无干扰。

薄层色谱法对上样量的要求较高,需要上样均匀且准确。如果毛细管的口径不均匀,点样量差异较大,条带迁移快慢不同,会导致结果不稳定。如果点样斑过大,则容易导致极性相近的物质无法完全分离。薄层色谱仪在中药有效成分检测应用

薄层色谱分析应用:

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