采用高效液相色谱仪法测定虫草中的核苷类成分，优化后的色谱条件为YMC-Polyamine 柱（250mm× 4.6mm，5μm）；采用梯度洗脱，流动相：乙腈- 水（V/V）：0～15min 为90：10，15～20min 为86.5：13.5，20～30min 为75：25，30～35min 为70：30；流速：1mL/min；柱温：30℃；检测波长：259nm；进样量：10μL。结果表明：胸腺嘧啶、虫草素、尿嘧啶、腺苷、腺嘌呤、尿苷、鸟嘌呤、次黄嘌呤均能得到较好分离，该方法稳定性好、精密度高、重现性好，适用于虫草中的核苷类成分的分析。经分析发现，蛹虫草子实体核苷类物质组成大致相似，但含量差异非常显著，同时发现蛹虫草培养基残基及固体发酵产物中虫草素含量较高，其他核苷类成分很少，因此认定蛹虫草培养基残基及固体发酵产物是非常优良的分离纯化虫草素的原料。
冬虫夏草(Cordyceps sinensis)是一种名贵的中药，现代科学研究发现其具有抗癌、增强免疫、降血压等多种药理活性。蛹虫草(Cordyceps militaris (L.ex Fr.)Link)又称北虫草、北冬虫夏草，与冬虫夏草同属异种，有效成分相近，同时又可以大规模的人工栽培，现已被广泛应用于药品和保健品中。蛹虫草所含的一类重要活性成分是核苷和碱基，包括虫草素、腺苷等。其中腺苷具有改善心脑血液循环、抑制中枢神经递质释放等多种活性，现已被我国用作冬虫夏草及其制品和代用品的质控指标之一；虫草素则具有抗病毒、抑制肿瘤等功效，目前在美国作为治疗白血病药物的研究已经进入二期临床，开发潜力巨大。
目前，核苷类物质的检测方法以高效液相色谱仪分析为主，包括正相、反相、质谱联用等，还有毛细管电泳分析测定，但大都只将核苷类成分中的1～3 个作为质控指标进行评估。本研究在高效液相色谱中采用了正相柱分析，用8 个核苷类成分作为对照，考察测定方法的精密度、重复性和稳定性，以此作为各样品核苷类成分的分析方法。
另外，研究发现，人工栽培蛹虫草培养基中含有大量的虫草素，与相应的子实体相比，培养基来源充足，价格低廉，作为制备虫草素的原料，可以大大降低成本。但是由于目前栽培的蛹虫草菌种来源不同，其培养基中虫草素含量是否具有很大的差异，与对应的子实体中虫草素含量的差异是否存在相关性等需要进一步研究。故本实验对市场上冬虫夏草及不同来源的蛹虫草子实体中核苷类物质的含量进行分析测定，并对同一菌种的子实体和培养基进行核苷类成分的比较，分析蛹虫草固体发酵产物中核苷类成分的含量，为虫草相关制品的开发提供依据。
以上测定虫草中的核苷类成分高效液相色谱仪方案由山东润扬仪器有限公司液相色谱仪事业部整理制定，不尽事宜欢迎各界朋友共同探讨研究。更多分析上的详细资料可电话或通过公司网站了解垂询，欢迎合作。
