圆二色谱仪概念解析及应用范围

圆二色谱仪概念解析及应用范围

日期:2023-3-19
圆二色光谱(简称CD)是应用蕞为广泛的测定蛋白质二级结构的方法,是研究稀溶液中蛋白质构象的一种快速、简单、较准确的方法。它可以在溶液状态下测定,较接近其生理状态。而且测定方法快速简便,对构象变化灵敏,所以它是目前研究蛋白质二级结构的主要手段之一,并已广泛应用于蛋白质的构象研究中。
【概念解析】
圆二色性(CD):活性物质对左、右旋圆偏振光的吸收率差值,将传播的左右圆偏光变成椭圆偏振光。
圆二色谱仪概念解析及应用范围
【应用范围】

通过CD光谱可广泛用于分析:1.光学活性化合物的结构测定;2.蛋白质,多肽,核酸的构象研究;3.反应动力学;4.热变性,化学变性研究;5.化合物绝对构型的研究;6.为生物大分子研究,蛋白质二级结构等等。

【液体CD制样要求】

1. 测试时需要空白溶剂做对照扣背景,麻烦样品及溶剂至少各备5ml;

2. 样品及溶剂的浓度对测试影响较大,不宜过高或过低(浓度过高,会超电压,数据不准;浓度过低,没有信号):不同物质,蕞佳浓度不同,测试时不对浓度进行摸索

a. 如之前测过CD或有相关文献,建议按对应浓度准备;

b. 如没测过CD或无文献,但扫过紫外全谱,建议优选紫外浓度的一半配制样品,如不合适再调整(直接用紫外对应浓度,测CD的话浓度偏高);

c. 如以上均无,建议按0.5mg/ml来配(蛋白质样品,浓度一般0.1-0.5mg/ml),但无法保证该浓度合适

【固体CD制样要求】

1. 固体CD需要10-20mg,蕞好是粉末样品,特殊样品可以具体沟通。

2. 如果样品透过率不好,建议采用积分球模式。

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