棒状薄层色谱仪作为薄层色谱的重要组成部分,在石油化工、道路工程、营养食品、中药材、新能源材料等方面应用广泛,是不可或缺的重要手段。操作简单,样品检测时间短,操作费用低,检测结果重复性好等特点。那么,对于小白来说,棒状薄层色谱仪的TLC和硅胶又是什么?对此,润扬仪器技术人员简单介绍如下:
棒状薄层色谱TLC
薄层色谱仪分为板色谱和棒色谱。TLC作为一般原则,HPLC中使用的任何固定相都能用于TLC中,只要它们有均匀的细粒子尺寸或能与基质键合、传统的TLC板是20cm×20 cm,5cm×20 cm和1cm×3cm(显微镜玻璃片)。分析板厚度常常是0.100~0.250mm,吸附剂粒度平均为20 pm,分布范围从10~60pm。样品体积是1~5uL,市售20cmx20cm板有19通道和/或3cm距离的情性预吸附剂、制备TLC板的厚度为0.5~2mm。
而TLC棒是直径0.9mm×153mm玻璃棒和1.0mm×156mm玻璃棒。其硅胶/氧化铝粒度6~13pm,涂层厚度一般为0.02~0.05mm,需高温烧结老化制成。
HPTLC板用5um的颗粒制备,紧紧控制在窄的范围。板较小(10cm×10 cm和20cm ×20cm),展开速度较快,需要较小的样品体积(0.1~0.2uL)。吸附剂层本身一般较薄,表面更均匀。通过在TLC板中采用较小粒度的吸附剂床并严格控制粒度分布可提高分离效能,这可导致较小的谱带展宽,因而提高了分离度和分离组分检测的灵敏性。虽然小的粒度能降低流动相流动速度,但色谱床所需的长度显著地小于传统TLC的板长度。
棒状薄层色谱硅胶
硅胶比其他任何涂层材料都使用得多。硅胶层由均匀粒度(6~13pm)的小颗粒极稠密涂覆而成,具有光滑而均匀的表面,这种硅胶经酸洗、水洗至中性,经干燥将双取代羰基凝结为硅氧烷键对硅胶粉末而言常用的黏合剂是5%~20%的硫酸钙半水化合物,即精炼的石膏(硅胶G)。加入黏合剂可提高吸附剂颗粒的黏合性,并增加吸附剂层与棒的黏附性有时,石膏对某些类化合物的分离或它们的检测有干扰,在这种情况下,可使用专用的无机或不反应的有机黏合剂,使吸附剂层变硬并抗磨损有机黏合剂使硅胶棒更耐用。这种棒可承受大部分溶剂系统和任何展开试剂,而不会发生硅胶剥落或与试剂反应。当强酸炭化用来显色,或者如果没有使用特殊的非反应性有机黏合剂,而存在有机黏合剂与溶剂系统反应时,可使用无机黏合剂。
孔尺寸的选择可能是重要的分离因素。既然活性是孔直径的函数,较大的孔径提供了更为非极性的吸附剂 15nm直径的硅胶改善了较大的络合物分子的性能,可提供较大的样品容量。6nm孔直径的硅胶具有标准的极性特征。
当在实验室制备棒时,硅胶是以匀浆的形式喷涂于玻璃棒上的。当适当纯化后,硅胶很少或不催化不稳定物质的反应性。TLC硅胶吸附剂的表面积一般为300~500m2.g-1,孔径从4.0~8.0 nm。
硅胶用来分离酸性或中性物质和具有相对低的水溶性的混合物。为了使流动相的pH 低于酸性溶质的pKa值,在流动相中加人弱酸(一般是乙酸)。在碱性硅胶吸附剂中加入特定的物质能够有助于某种被分析物的分离。添加剂可在制时也注人到棒的固定相中。这样的添加剂举例如下:
1.由于硼酸根离子能与糖在不同程度上形成络合物,故硼酸可用于糖异构体的分离;
2.鳌合物生成试剂用于分离无机阳离子和酚羧酸;
3.硝酸银(银化)用于含有碳-碳双键化合物的分离;
4.稀的(0.1mol/L)氢氧化钠可增加碱性,能改善有机金属化合物、生物碱和一些酸类的分离;
5.草酸钾是用于分离聚磷酸肌醇,酸性的乙酸锰用来分离磷脂。


