贝叶经在狭义上指以贝叶棕和糖棕等棕榈科植物的加工叶片为载体记载佛教经典的古籍文献。这类经过特殊处理的书写材料,传统称为“贝多罗叶”或简称为“贝叶”。这类文献曾盛行于纸张普及前的南亚和东南亚地区,承载着珍贵的宗教典籍与历史文化信息,具有不可替代的价值。贝叶经载体材料的主要成分为木质纤维素(纤维素、半纤维素和木质素)。在保存过程中,贝叶常受到环境微生物的侵蚀,导致材质机械强度下降、酸化和信息丢失,极其不利于文物的长期保存。目前,针对贝叶经的保护研究多集中于贝叶物种鉴定、宏观病害调查与修复实践,如清洗、脱酸、除霉和裂隙修补等。
霉菌是导致贝叶经劣化的主要生物因素,宏观研究难以从本质上阐明微生物对贝叶材料破坏的分子机理。热裂解-气相色谱-质谱联用(Py-GC/MS)技术作为一种强大的分析手段,能够在不进行复杂前处理的条件下,通过一次分析直接获取复杂有机大分子的组成与结构信息。该技术通过热裂解将不挥发性高分子转化为易挥发的特征小分子片段,再经气相色谱分离和质谱鉴定,实现对聚合物降解过程的精准解析。在园林防护、考古木质文物以及纸张等木质纤维素材料的降解研究中,Py-GC/MS已被证明是揭示真菌降解机理的关键技术。
本研究聚焦于贝叶经的书写载体,即按传统工艺加工制备的贝叶棕叶片,选取从贝叶经文物表面分离的青霉(Penicilliumsp.)、肉色曲霉(Aspergilluscarneus)和链格孢菌(Alternaria sp.)为降解菌种,通过模拟降解实验与Py-GC/MS分析,根据特征裂解产物变化揭示了3种霉菌在分子层面对贝叶木质纤维素的降解机理,为阐明贝叶经及其它同类文物的生物劣化机制及制定预防性保护策略提供了科学依据。
1、实验部分
1.1 仪器与材料
热裂解仪(PY-GC);GC-2030气相色谱-质谱仪(GC-MS)。
贝叶样品购自云南省昆明市,其制作遵循当地用于制备贝叶经载体的传统工艺。具体流程包括:选取成熟的贝叶棕(Corypha umbraculifera)叶片,捆扎,与发酵淘米水以及酸藤等共煮,随后进行清洗、晾晒、压平及裁切修整,最终获得可供书写的平整叶片。
实验所用青霉、肉色曲霉和链格孢菌均由本研究组从西藏地区及昆明博物馆馆藏贝叶经文物表面分离、纯化得到。
1.2 模拟降解样品制备
为获得均匀且可重复的样品,所有贝叶样品经球磨仪研磨成粗纤维状,充分混合后,于121℃下高温灭菌处理。将灭菌后的贝叶样品平铺于无菌载玻片上,并置于上述3种霉菌的培养皿中。将所有培养皿移入微生物培养箱,在28℃、相对湿度80%条件下进行恒温恒湿培养。以1周为1个实验周期,分别于第1、2、3、4和5周周末取样。每个菌种均平行制备3份生物学重复样品,用于后续Py-GC/MS分析。文中后续部分采用如下缩写:链格孢菌降解样品记为L,青霉降解样品记为Q,肉色曲霉降解样品记为U。培养1周后贝叶样品表面的真菌生长形貌见图1,可见3种霉菌均已在样品表面形成典型菌落。
图1:贝叶样品表面真菌生长形貌(培养1周)
Penicillium sp.:青霉;Aspergillus carneus:肉色曲霉;Alternaria sp、: 链格孢菌
1.3 Py-GC/MS分析条件
Py-GC/MS分析方法参考相关的方法,并对本实验的仪器配置和实验条件进行了适当调整。准确称取约100μg样品,置于热裂解样品杯中,随后置于EGA/PY-3030D裂解仪上进行热裂解,裂解温度为550℃。裂解产物直接导入GC/MS系统(QP 2020,Shimadzu)进行分析。
GC条件:采用Ultra AL-LOY+-5色谱柱(30m×0.25mm,0.25μm);进样口温度280℃。程序升温如下:初始40℃保持2min,以10℃/min速率升至100℃保持2 min,再以4℃/min速率升至250℃保持3min,最后以15℃/min速率升至300℃保持2min。载气为高纯氦气(He),流速为1.0 mL/min,分流比为20:1。
质谱条件:电离能量为70eV,温度为230℃,四极杆温度为150℃,传输线温度为320℃。扫描范围为m/z 40~550,溶剂延迟3min。
数据处理:通过质谱与Py-GC/MS系统附带的质谱库对比,鉴定分解产物。使用色谱软件进行未知物分析,软件定性分析总离子色谱,使用NIST17数据库进行谱库匹配,采用解卷积对峰面积进行积分。
免责声明:本文章部分内容及图片采摘自李路希,王瑛,杨琴,成小林的“应用热裂解-气相色谱-质谱联用技术研究微生物对贝叶经木质纤维素的降解机理”,《分析化学研究报告》第54卷第3期(2026年3月464-471)。本文不代表个人观点,基于传播相关知识的学习与交流,版权归原作者或平台所有,亦无任何利益驱动,如有侵权请联系做删除处理。



